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DNA合成儀基本組成結構和性能

 DNA合成儀基本組成結構和性能
(一)DNA合成儀壓力系統
  系統壓力由超純氬(99.998%)提供。氬氣密度高、氧污染少,因此高壓氬氣常常用來啟動真空輔助系統及供給合成儀調節器。進入合成儀的氬氣通過10txm的顆粒過濾器后送到3個壓力調節器,調節器將氬氣輸送到特定的壓力閥來增加試劑和溶劑瓶的壓力。調節器也將氬氣供給柱子和試劑閥體。
(二)試劑和溶劑儲液瓶
  儀器上每個儲液瓶都有特定的位置,儲液瓶蓋座和儀器上所有號碼相對應,儀器上的位置或儲液瓶的編號都是1—8(5個堿基的儀器為1~5)、9、10、11、12、14、15、18和19(配有自動分析的儀器)。將1~8號瓶向上推,在聚四氟乙烯插塞周圍有一“O”形環,每一瓶頸內部形成一氣密塞。因為試劑輸送系統是要加壓的,所以要使瓶   子與儀器之間的密封塞保持氣密性。選擇合適的一次性塞及在瓶上加“O”形環可以加強氣密性。
(三)DNA合成儀壓力管路及輸送管路
  每個瓶子都有一個氬氣壓力管道及輸送管道進入瓶蓋插塞,對于亞磷酰胺,1—8號瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上,而輸送管卻伸到瓶的底部。當閥門正確設置打開時,儲液瓶上部空間由氬氣加壓,液體被推進輸送管,流到其目的地。
(四)亞磷酰胺瓶排氣
  除了加壓外,亞磷酰胺瓶都是用壓力排氣管排氣的。把亞磷酰胺放人儀器前,要用氬氣排除空氣使其凈化。凈化是通過輸送管輸送氣體,當氣體輸送到瓶內時,空氣經壓力排氣管排出。這是由瓶子更換步驟自動完成的。廢液瓶是輸送系統的低壓側,必須將出口與大氣相通。要確保排氣管通到通風柜。如果排氣管阻塞,將會產生反壓,試劑和溶劑的輸送會受到抑制。
(五)DNA合成儀輸送閥塊
  試劑輸送系統包括兩個試劑閥塊(8堿基儀器有3個)及2個或4個柱閥塊。閥塊控制氣體和化學試劑流人柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外,試劑和溶劑都被同時輸送到所有活化柱。當有多個活化柱時,對流速的細微變化,以自動調節每個柱子的輸送次數來補償。每一個5—端口柱閥塊將流出物導人廢液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或沖洗柱內和柱閥塊內的試劑的氬氣。
(六)輔助真空
  對于閥塊的適當運行,關鍵是隔膜形成一個圓頂小空隙,每次電磁閥打開時,抽氣泵為每個閥塊提供了輔助真空,輔助真空在隔膜的螺線管一側形成,使隔膜形成一圓頂空隙。
(七)柱子
  起始結合在載體上的核苷酸是裝在一次性的柱子中,除柱體外,還有2個固定過濾板和2個接頭,所有的部件都由惰性材料制成。固定過濾板是多孑L性聚苯乙烯固定在兩端蓋子中。人口和出口都是母路厄氏(1uer)接頭,與儀器的公路厄氏接頭配對。柱子是對稱的(沒有頂端和底部、前后之分),可以以任何方式與公路厄氏接頭相連接。每一個柱子都用顏色編號,表示不同的起始核苷酸,以及有一個唯壹的連續順序號碼。正常的流路是從底部進入,通過向上輸送液體,使CPG顆粒上升并保持懸浮狀態。溶劑和試劑的流速已經設置好,能使顆粒適當地混合。
(八)路節流閥
  試劑通過底部的luer接頭,流到柱子,如果沒擰上下面的一個luer接頭,應會在一個圓柱形的玻璃流路節流閥上發現。試劑通過流路節流閥中一個很小的通道流到柱子。小量的試劑可以在流路節流閥中結晶,長期這樣會造成流路阻塞。
(九)廢液和排氣
  大多數化學試劑輸送的*終點是廢液瓶,廢液瓶是一個空立著的10L的聚苯乙烯容器,可放在合成儀附近的地板上或放在低于儀器的附近工作臺上。排氣管將廢氣導人適當的排氣裝置,如排煙罩
(十)電導池
  電導流動池是為了測定在每個DNA合成循環內釋放的DMT陽離子的總電導而設計的。流動池是由一空隙隔開的兩個電極組成,在空隙之間應用一小電壓。DMT陽離子流過電導池時起電導作用。
(十一)電池
  DNA合成儀一般帶有鋰電池,可以使用幾年。當主電源斷開時,所有的合成參數都被保留下來。這些參數包括儲存的DNA序列,用戶設定的循環、步驟和功能,以及瓶子使用資料等。如果正在合成中電源出現故障,合成將被中斷,只有主電源恢復時合成才可重新開始。電池還保持合成儀內部的時鐘計時。
(十二)控制器
  控制器指導和初始合成儀的所有活動,它的主要部分是軟件、微處理機、顯示屏幕、鍵板及相關的電子部件。軟件控制合成的所有必要操作并由微處理機來解釋和執行。軟件儲存在一個可取出的存儲卡中,這個存儲卡插在儀器的背面。合成信息顯示在液晶顯示屏上,通過選擇鍵板上的鍵可與儀器交流。軟件是“菜單驅動”,通過按適當的鍵,可選擇一項,給予指令。為了完成自動合成,軟件應用一個包含一系列步驟的循環來完成全部化學反應。

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